Качественная и количественная расшифровка анализа на ДНК гепатита у женщин старше 50 лет

Анализ на наличие ДНК вируса гепатита у женщин старше 50 лет является важным инструментом для диагностики и оценки активности инфекции. Количественная расшифровка результатов позволяет определить уровень вирусной нагрузки, что, в свою очередь, способствует правильному выбору тактики лечения и контролю за состоянием пациента.

Учитывая возраст и возможные сопутствующие заболевания, необходимо тщательно интерпретировать полученные данные, чтобы минимизировать риски и повысить эффективность терапии. Регулярное тестирование в этой группе пациентов помогает выявить вирусную инфекцию на ранних стадиях и улучшить прогноз заболеваний печени.

Хронический вирусный гепатит В у взрослых

Хронический гепатит В – это неинфекционное заболевание печени, обусловленное вирусом гепатита B, которое проявляется наличием вирусного поверхностного антигена гепатита B (HBsAg) в крови или сыворотке в течение более 6 месяцев [1,2].

I. ВВОДНАЯ ЧАСТЬ

Заголовок протокола: Хронический вирусный гепатит B у взрослых.

Код протокола:

Коды МКБ-10:

B 18.1 – Хронический гепатит В без дельта агента;

B 18.0 – Хронический гепатит В с дельта-агентом.

Сокращения, применяемые в данном протоколе:

АЛТ – аланинаминотрансферазаAMA – антимитохондриальные антителаАН – аналоги нуклеозидов/нуклеотидовАСТ – аспартатаминотрансферазаАФП – альфа-фетопротеинВГВ – вирусный гепатит BВГН – верхняя граница нормы

ВГС – вирусный гепатит C

ВГD – вирусный гепатит D

ВИЧ – вирус человеческого иммунодефицита

ВРВ – варикозно расширенные вены

ГТП – гамма-глутамилтрансфераза
ГЦК – гепатоцеллюлярная карцинома
ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота
ИМТ – индекс массы тела
ИАГ – индекс гистологической активности
ИСТ – иммуносупресивная терапия

ИФА – это иммуноферментный анализ

ИХА – это иммунохимический анализ

КТ – это компьютерная томография

МЕ – это международные единицы

Мл – это миллилитр

МНО – это международное нормализованное отношение

МРТ – это магнитно-резонансная томография

ОАК – общий анализ крови

ОАМ – анализ мочи в общем ОБП – органы, расположенные в брюшной полости ПБП – биопсия печени, проводимая с помощью пункции ПВ – время протромбинового коагуляционного пути ПВТ – терапия, направленная против вирусов ПЕГ-ИНФ – интерферон с пегилированием

ПЦР – реакция полимеразной цепной реакции

РК – Республика Казахстан

РНК – это рибонуклеиновая кислота

СОЭ – это скорость оседания эритроцитов

ТП – трансплантация печени

ТТГ – тиреотропный гормон

УЗИ – ультразвуковое исследование

УЗДГ – ультразвуковая допплерография

ХГ – хронический гепатит

ХГВ – хронический гепатит В

ХГD – хронический гепатит D

ХГС – хронический гепатит C

ЦП – цирроз печени

ЩФ – щелочная фосфатаза

ЭГДС – эзофагогастродуоденоскопия

ЭКГ – электрокардиографическое исследование

УД – уровень доказательности

ANA – антитела к ядерным антигенам

anti-HBc /IgM – антитела класса М к HBcAg

anti-Hbe – антитела к антигену HBe

anti-HBs – антитела к поверхностному антигену HBsAg

anti-HCV – антитела к вирусу гепатита C

anti-HDV – антитела к вирусу гепатита D

anti-HDV IgM – антитела класса М к вирусу гепатита D

anti-HIV – антитела к вирусу иммунодефицита человека

anti-HBc /IgG – антитела класса G к HBcAg

APRI – отношение АСТ к числу тромбоцитов

ETV – энтакавир

HAV – вирус гепатита A

HBcAg – сердцевинный антиген вируса гепатита В

HBeAg – внутренний антиген вируса гепатита В

HBsAg – поверхностный антиген вируса гепатита В

HBV – вирус гепатита В

HBV ДНК – ДНК вируса гепатита В

HCV – вирус гепатита С

HCV РНК – РНК вируса гепатита С

HDV – вирус гепатита D

HDV РНК – РНК вируса гепатита D

IgG – антитела класса G

IQR – коэффициент интерквартильного разброса

IU – международные единицы

N – норма

NICE – Национальный институт здоровья и ухода

F – фиброз

FDA – Управление по контролю за продуктами и медикаментами

LAM – ламивудин

LdT – телбивудин

LBx – биопсия печени

MELD – Модель для оценки последней стадии заболевания печени

log – логарифм

Дата создания протокола: 2015 год.

Категория пациентов: взрослые, беременные.

Среди пользователей протокола можно выделить: гастроэнтерологов, инфекционистов, хирургов, трансплантологов, онкологов, нефрологов, терапевтов и врачей общей практики.

Анализ уровня доказательности представленных рекомендаций.

Шкала уровня доказательности:

Клиническая классификация

В настоящее время отсутствует общепринятая система классификации. При установлении диагноза необходимо указать вирусологический статус (HBeAg-позитивный или HBeAg-негативный), уровень вирусной нагрузки, а также наличие дельта-агента. Важно определить активность заболевания (как биохимическую, так и гистологическую) и стадию прогрессирования болезни (по данным непрямой эластографии или морфологического анализа) [3,4].

II. СПОСОБЫ, ПОДХОДЫ И МЕТОДИКИ ДИАГНОСТИКИ И ТЕРАПИИ

Перечень основных и дополнительных диагностических мероприятий

Ключевые (необходимые) диагностические процедуры, выполняемые на амбулаторном уровне (анализы, требуемые для всех пациентов с ВГВ):

1. Общий анализ крови с определением количества тромбоцитов;

2. Биохимический профиль: АЛТ, АСТ, щелочная фосфатаза, общий билирубин, прямой билирубин, непрямой билирубин, ГГТП, альбумин, креатинин.

3. Коагулограмма: МНО или ПВ;

4. Серологические анализы (методом ИХА/ИФА): HBsAg (качественный тест), HBeAg, anti-HBs, anti-HBe, anti-HBc /IgM, anti-HBc /IgG, anti-HDV IgM, anti-HDV total, anti-HCV, anti-HIV.

5. Альфа-фетопротеин (АФП);

6. Молекулярная диагностика на основе полимеразной цепной реакции: • Определение HBV-ДНК (качественный тест); • В случае положительного результата качественного теста HBV-ДНК – количественное определение HBV-ДНК; • При наличии anti-HDV – определение HDV-РНК (качественный тест); • При положительном результате качественного теста HDV-РНК – количественное определение HDV-РНК;

7. Ультразвуковое исследование органов брюшной полости (УЗИ ОБП): печень, селезенка, желчный пузырь, поджелудочной железы;

8. Непрямая эластография.

Дополнительные диагностические исследования, проводимые в амбулаторных условиях:

• Биохимический профиль:мочевина, калий, натрий, гамма-глобулины, общий холестерин, триглицериды, глюкоза, сывороточное железо, ферритин, аммиак;

• HBsAg (количественный анализ);

• anti-HAV;

• церулоплазмин;

• Функциональные тесты щитовидной железы: ТТГ, свободный Т4, АТ к ТПО;

• Тест на беременность;

• УЗДГ сосудов печени и селезенки;

• ЭГДС;

• КТ брюшной полости (при наличии подозрений на опухоли и тромбозы – с внутривенным контрастированием);

• МРТ органов брюшной полости (при подозрении на объёмные образования и тромбозы – с в/в контрастированием;)

• МРХПГ;

• Исследование глазного дна.

Минимальный набор исследований, который следует выполнить при направлении на плановую госпитализацию: в соответствии с внутренними правилами стационара с учетом действующего приказа компетентного органа здравоохранения.

Основные (обязательные) диагностические обследования, проводимые на стационарном уровне:

• Общий анализ крови с определением количества тромбоцитов;

• Биохимический анализ: АЛТ, АСТ, щелочная фосфатаза, общий и прямой билирубин, ГГТП, альбумин, креатинин.

• Анализ на коагуляцию: МНО или ПВ;

• Серологические исследования (методом ИХА/ИФА):HBsAg (качественный тест), HBeAg, anti-HBs, anti-HBe, anti-HBc /IgM, anti-НВс /IgG, anti-HDV IgM, anti-HDV total, anti-HCV, anti-HIV.

Молекулярная диагностика с использованием полимеразной цепной реакции:

• Выявление HBV-ДНК (качественный анализ);

• В случае положительного результата качественного анализа HBV-ДНК – количественное измерение HBV-ДНК;

• При наличии anti-HDV – определение HDV-РНК (качественный анализ);

• При положительном результате качественного анализа HDV-РНК – количественное измерение HDV-РНК;

• Ультразвуковое исследование органов брюшной полости (УЗИ ОБП): печень, селезенка, желчный пузырь, поджелудочная железа;

Дополнительные диагностические обследования, проводимые на стационарном уровне:

• Биохимический анализ: уровень мочевины, содержание калия, натрия, гамма-глобулинов, общий холестерин, триглицериды, уровень глюкозы, сывороточное железо, ферритин, аммиак;

• HBsAg (количественный анализ);

• анти-HAV;

• церулоплазмин;

• Функциональные анализы щитовидной железы: ТТГ, свободный Т4, антитела к ТПО;

• Тест на беременность;

• УЗДГ сосудов печени и селезенки;

• ЭГДС;

• КТ органов брюшной полости (если есть подозрения на объемные образования и тромбозы – с внутривенным контрастированием);

• МРТ органов брюшной полости (при подозрении на объёмные образования и тромбозы – с в/в контрастированием;)

• МРХПГ;

• исследование глазного дна.

На этапе экстренной медицинской помощи диагностические процедуры не проводятся.

Диагностические критерии постановки диагноза

Обращения и история болезни

Начальная диагностика больных с хроническим гепатитом B должна включать в себя детальный сбор обращений, истории болезни и физикального осмотра, с акцентом на факторы риска, такие как сопутствующие инфекции, злоупотребление алкоголем, наследственные предрасположенности к инфекции ВГВ и раку печени [1,3] (УД – А).

Жалобы [1] Хронический гепатит В часто протекает бессимптомно на ранних стадиях заболевания; могут быть недомогание; усталость. На более поздних стадиях появляются симптомы, связанные с портальной гипертензией и терминальной стадии заболевания печени (желтуха, энцефалопатия, асцит, кровотечение из варикозных узлов и т.д.).

Хронический гепатит В может проявляться вне печени различными симптомами, такими как: апластическая анемия, папулезный акродерматит, синдром Шегрена, кожный васкулит, узелковый полиартериит, полиартралгии, миалгии, миокардит, гломерулонефрит, фиброзирующий альвеолит, криоглобулинемия и прочие.

Анамнез. Важно прояснить следующие факторы риска заражения HBV-инфекцией [1,3]:

• иммиграция из стран с высоким уровнем заболеваемости HBV;

• наличие HBV-инфекции у родителей;

• контакт с носителем HBV;

• сексуальные отношения с носителем HBV или HIV;

• большое количество сексуальных партнеров;

• мужчины, имеющие интимные связи с мужчинами;

• употребление внутривенных наркотиков в прошлом или настоящем;

• пребывание в местах лишения свободы;

• проведение диализа;

• переливание крови, хирургические операции, трансплантация органов и тканей.

Физикальное обследование [1] При физикальном осмотре можно не обнаружить никаких специфических признаков или выявить стигмы хронического заболевания печени: желтуху гепатомегалию, спленомегалию (10%), пальмарную эритему, сосудистые звездочки, полиартрит. При развитии цирроза печени отмечаются симптомы, обусловленные дисфункцией печени и портальной гипертензией.

Научные исследования [3]:

• Общий анализ крови с количеством тромбоцитов (УД – А) осуществляется для диагностики гиперспленизма (цитопении), выявления анемии (разной этиологии), определения показателей системного воспалительного ответа, а также для выявления противопоказаний и наблюдения за побочными эффектами ПВТ.

• Биохимический анализ крови необходим для определения следующих биохимических синдромов (УД – А):

− Цитолизный синдром: увеличение уровней АЛТ и АСТ. Степень биохимической активности определяется по показателю АЛТ [1] (Таблица №2).

Таблица 2. Уровень биохимической активности

Степень активности

− Синдром холестаза: увеличенные значения ЩФ, ГТП, уровень прямого билирубина и холестерина;

− Синдром печеночно-клеточной недостаточности: пониженный уровень альбумина, рост МНО, увеличение ПВ.

− Синдром шунтирования: рост концентрации аммиака.

− Синдром иммунного воспаления: ускорение СОЭ, гипергамма-глобулинемия, обнаружение аутоантител.

Кроме того, в биохимическом анализе крови проводится оценка степени тяжелости болезни печени:

− уровень АЛТ обычно превышает уровень АСТ, однако соотношение может изменяться при прогрессирующем фиброзе и циррозе; − основные признаки цирроза — продолжающееся снижение уровня плазменного альбумина, увеличение протромбинового времени, снижение количества тромбоцитов.

• Альфа-фетопротеин (АФП) применяется в качестве скринингового теста на ГЦК [3]. (УД – А).

• Уровни сывороточного железа и ферритина важны для того, чтобы исключить гемохроматоз и синдром вторичной железной перегрузки.

• Серологическая диагностика проводится с использованием иммунохемилюминисцентного анализа (ИХА), при отсутствии ИХА – иммуноферментного анализа (ИФА); вирусологическая диагностика HBV-инфекции (в целях определения репликации вируса) проводится на основе полимеразной цепной реакции (качественный тест, при положительном результате – количественный) с использованием автоматизированных систем закрытого типа в режиме реального времени с нижним лимитом определения 6-10 МЕ/мл.

Фаза инфекции HBV определяется на основе серологических и вирусологических методов диагностики [1,3]. В рамках естественного течения хронического вирусного гепатита B выделяются несколько фаз (См. Таблицу №3, Рисунок №1):

− Иммунотолерантная

− Иммунореактивная (фаза иммунного клиренса или HBeAg-позитивный ХГВ)

− Неактивное носительство HBsAg (низкая репликация)

− HBeAg-негативный ХГВ (реактивация инфекции)

− HBsAg-негативная (постинфекционный HBV, оккультный ХГВ)

Установление фазы ХГВ важно для определения прогноза заболевания и показаний к противовирусной терапии.

Таблица 3. Этапы хронического вирусного гепатита В.

<1000 МЕ/мл

<2000 (в отдельных случаях до 20000) МЕ/мл

Рисунок№1. Диагностика и естественное течение ХГВ

Важно искать другие потенциальные причины хронического заболевания печени, включая ко-инфекцию с HDV (обязательно нужно определять уровень anti-HDV у всех пациентов с HBV-инфекцией), HCV и/или ВИЧ. У пациентов с хронической HBV-инфекцией нужно проверять наличие антител к вирусу гепатита А (анти-HAV), а в случае их отсутствия рекомендуется проводить вакцинацию против HAV-инфекции.

Инструментальные исследования

Ультразвуковое исследование (УЗИ) помогает оценить структуру печени, выявить признаки фиброза и развитие цирроза печени (неровные контуры, нодулярная структура, уменьшение правой доли, наличие асцита, расширение или тромбоз печеночных и селезеночных сосудов, наличие шунтов, спленомегалия и другие симптомы портальной гипертензии), а также определить наличие объемных образований (например, ГЦК) [1,2] (УД – А). Для более точной оценки изменений в кровотоке считается целесообразным применение ультразвуковой допплерографии (УЗДГ).

Другие лучевые методы исследования (КТ или МРТ с внутривенным контрастным усилением) используются для верификации объемных образований и тромбозов [2,5].

Эндоскопические процедуры имеют важное значение для определения заболеваний верхних отделов желудочно-кишечного тракта, таких как ВРВ пищевода и желудка, портальная гастропатия, а также других заболеваний, затрагивающих слизистую оболочку гастродуоденальной области, и для выявления увеличения геморроидальных вен.

Определение стадии фиброза осуществляется с применением пункционной биопсии печени, а также неинвазивных методов, включая неэластографию и биомаркеры, такие как расчетные индексы и сертифицированные коммерческие наборы.

Пункционная биопсия печени (ПБП) для определения степени воспаления, некроза и фиброза рекомендуется пациентам, т. к. сведения о морфологических изменениях печени могут оказаться полезными при принятии решения о начале терапии [6] (УД – А). Биопсия также может помочь выявить другие возможные причины поражения печени, такие как стеатоз, стеатогепатит, атоиммуный гепатит и т.д. Несмотря на то, что биопсия печени — инвазивная процедура, риск тяжелых осложнений крайне низок (1:4000-10 000) [6]. Очень важно, чтобы при пункционной биопсии размер получаемого образца был достаточным для точного суждения о степени поражения печени и выраженности фиброза.

Пациентам с показателями НЭ в пределах серой зоны (от 6 до 10 кРа) может быть рекомендована пункционная биопсия печени для более точного определения стадии фиброза.

В некоторых случаях проведение биопсии оправдано и для пациентов младше 30 лет, если результаты НЭ составляют менее 6 кПа, а уровень ДНК HBV превышает 2000 МЕ/мл и отмечается повышенный уровень АЛТ (≥ 30 МЕ/л у мужчин и ≥ 19 МЕ/л у женщин) по данным двух анализов, проведённых с интервалом в 3 месяца.

Биопсия обычно не требуется у больных с клиническими признаками цирроза печени, а также у пациентов, которым терапия показана независимо от степени активности процесса и стадии фиброза. Проведение пункционной биопсии также не рекомендуется пациентам с результатами транзиторной эластографии менее 6кПа, нормальной активностью АЛТ и уровнем HBV-ДНК < 2000 МЕ/мл, так как вероятность серьёзного поражения печении и необходимости проведения противовирусной терапии у таких пациентов крайне мала.

Анализ результатов ПБП осуществляется с использованием полуколичественных шкал, которые описывают уровень некровоспалительных изменений и стадии фиброза печеночной ткани [6] (см. Таблицы 4 и 5).

Таблица 4. Морфологическая диагностика уровней некровоспалительной активности гепатита

Таблица 5. Морфологическая оценка стадии заболевания печени (степень фиброза)

METAVIR*

*Для оценки стадии заболеваний печени чаще всего используется система METAVIR

Непрямая эластография (НЭ) более важна в клинической практике по сравнению с сывороточными биомаркерами фиброза печени [7]. Она позволяет оценивать изменения эластических характеристик печени на основе отраженных вибрационных импульсов и их анализа с помощью компьютера. Результаты непрямой эластографии представлены в Таблице №6.

Значение от 12-14 кПа часто указывает на цирроз печени. В сомнительных случаях, если это повлияет на тактику ведения больного, рекомендуется биопсия печени (схема №1). Среди больных хроническим гепатитом В с повышением уровня АЛТ, интерпретация данных НЭ должны проводиться с осторожностью, так как данные могут быть завышенными, даже в течении 3 – 6 месяцев после нормализации АЛТ [9,10].

Таблица 6. Анализ итогов непрямой эластографии

Как подготовиться

Заранее

• проконсультируйтесь с врачом относительно приема медикаментов перед исследованием и в день его проведения, а также уточните другие важные требования подготовки
• воздержитесь от сдачи анализов крови сразу после проведения рентгенографии, флюорографии, ультразвукового обследования или физиотерапии

Накануне

• уменьшите потребление жареных и жирных продуктов, избегайте алкоголя
• откажитесь от интенсивных физических упражнений
• за 4 часа до анализа крови не ешьте, пейте лишь чистую воду без газа

В день сдачи

Перед тем, как сдать кровь

• не курите в течение нескольких минут
• проведите 15-30 минут в спокойной обстановке

Результат

Интерпретация результатов анализов носит информационный характер, не является диагнозом и не заменяет консультации врача. Референсные значения могут отличаться от указанных в зависимости от используемого оборудования, актуальные значения будут указаны на бланке результатов.

Результаты исследований будут представлены в форме десятичных логарифмов.

Десятичным логарифмом называют логарифм с основанием 10.

Понимание результата в данном контексте таково: если, к примеру, результат равен 3,4 Lg МЕ/мл или 4,1 Lg копий/мл, это означает, что анализ показал 10 в степени 3,4 МЕ или 10 в степени 4,1 копий на мл соответственно.

Единица измерения: Lg(МЕ/мл) Lg(копий/мл)

Кто назначает анализ

Для количественного анализа крови на инфекцию HBV с использованием метода ПЦР могут быть направлены следующие специалисты:

• инфекционист;
• эндокринолог;
• гепатолог;
• терапевт.

Особенности подготовки к исследованию

Советы для пациента:

• рекомендуется сдавать кровь в утренние часы (с 8 до 11);
• за 8 часов до анализа следует избегать пищи и напитков, кроме обычной негазированной воды;
• в течение часа перед забором биоматериала курение противопоказано;
• за сутки до теста стоит отказаться от алкоголя, чрезмерной физической активности, стрессов и изменить питание, исключив жирные и жареные блюда;
• перед сдачей крови рекомендуется отдохнуть в течение 15-20 минут, находясь в спокойном положении;
• не следует сдавать анализ ранее чем через 7 дней после любых процедур, таких как инструментальные обследования, физиотерапия или медицинские вмешательства;
• если была проведена антибиотикотерапия, анализ крови следует сдавать спустя 14 дней после завершения лечения;
• прежде чем начинать прием медикаментов, необходимо проконсультироваться с врачом о возможности выполнения анализа или целесообразности временной приостановки их употребления.

Показания к исследованию:

• Люди, у которых обнаружен HBsAg;
• Клиенты с хроническим гепатитом B до начала и в процессе антивирусного лечения.

Количественное определение ДНК BГB (вирусная нагрузка) необходимо для диагностики заболевания, мониторинга течения инфекции и определения эффективности проводимого лечения.

Диапазон линейного измерения: 150-100 000 000 МЕ/мл.

Чувствительность аналитики: 50 МЕ/мл.

Для пересчета результата исследования в копии/мл необходимо результат исследования полученный в МЕ/мл умножить на 1,70 (1 МЕ=1,70 копий ДНК вируса гепатита В).

«Не найдено». ДНК вируса гепатита B не была обнаружена, либо её уровень ниже предела чувствительности теста, составляющего 50 МЕ/мл.

«Обнаружено менее 150 МЕ/мл». ДНК вируса гепатита B выявлена в концентрации ниже 150 МЕ/мл.

Если ДНК вируса гепатита B обнаружена в концентрации от 150 МЕ/мл до 10^8 МЕ/мл, в результирующем отчёте указывается количество выделенной ДНК ВГВ.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

Вирус гепатита В (HBV), определение ДНК методом ПЦР в крови (количественное исследование — вирусная нагрузка)

Гепатит B (ВГВ, HBV) представляет собой острое инфекционное заболевание, вызванное ДНК-содержащим вирусом HBV, которое преимущественно передается парентеральным путем. В клинически выраженных случаях оно проявляется симптомами острого поражения печени и интоксикации (с желтухой или без нее), а также имеет различные клинические проявления и результаты: от полного выздоровления до развития хронического гепатита B, цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. Вирус гепатита B очень устойчив к воздействию внешней среды, включая УФ-излучение, различные температуры и detergents.

Гепатит B относится к антропонозным болезням. Источниками инфекции являются люди, страдающие различными формами этого заболевания. Вирус обнаруживается в крови, сперме и вагинальном секрете инфицированных лиц. Механизм передачи инфекции – гемоконтактный (парентеральный).

Пути инфицирования: естественные (половой, бытовой, перинатальный) и искусственные, связанные с парентеральными вмешательствами. Восприимчивость к ВГВ – всеобщая, обусловленная наличием специфических рецепторов к HBs антигену на гепатоцитах.

Искусственные пути передачи возбудителей играют ключевую роль в эпидемиологии парентеральных гепатитов, так как они реализуются в процессе выполнения как медицинских, так и немедицинских процедур, связанных с нарушением целостности кожи или слизистых оболочек, а также с возможностью их повреждения.

Заражение вирусами парентеральных гепатитов во время немедицинских процедур, которые приводят к травмам кожи или слизистых, происходит, например, при инъекционном введении наркотиков (риск заражения составляет 80-100%), а Во время татуировок, пирсинга, ритуалов и косметических ухаживаний, manicure и pedicure, осуществляемых с использованием загрязнённых инструментов.

Группу повышенного риска составляют медицинские работники, пациенты, нуждающиеся в гемодиализе или переливаниях крови, заключенные, члены семей HBs-положительных лиц, новорожденные от HBs-положительных матерей.

В жизненном цикле вируса гепатита В выделяют два этапа: этап репликации и этап интеграции.

На этапе репликации осуществляется размножение вируса. ДНК вируса проникает в ядро гепатоцита, где с помощью ДНК-полимеразы формируется нуклеокапсид, включающий ДНК вируса, а также антигены HBcAg и HBeAg, которые являются главными целями для иммунной системы.

После этого нуклеокапсид перемещается из ядра в цитоплазму, где происходит репликация белков оболочки (HBsAg), что приводит к формированию полноценного вириона. В процессе этого избыточное количество HBsAg, которое не было использовано для сборки вируса, через межклеточное пространство попадает в кровоток. Завершение формирования вируса (репликации) происходит с презентацией растворимого нуклеокапсидного антигена – HBeAg на поверхности гепатоцита, что позволяет иммуноцитам его "распознать". Антиген HBcAg присутствует в печеночной клетке, но не может быть выявлен серологическими методами, так как он не обнаруживается в свободной форме в крови. Вместо этого в крови определяется наличие антител (anti-HBc) к этому антигену, которые вырабатываются благодаря его высокой иммуногенности.

В фазе интеграции происходит интегрирование (встраивание) фрагмента вируса гепатита В, несущего ген HBsAg, в геном (ДНК) гепатоцита с последующим образованием преимущественно HBsAg. При этом репликация вируса прекращается, однако генетический аппарат гепатоцита продолжает синтезировать HBsAg в большом количестве.

Вирусная ДНК способна интегрироваться не только в гепатоциты, но В клетки поджелудочной железы, слюнные железы, лейкоциты, сперматозоиды и клетки почек. Процесс интеграции сопровождается развитием клинико-морфологической ремиссии. На данном этапе в большинстве случаев формируется состояние иммунологической толерантности к вирусу, что приводит к снижению активности заболевания и наличию HBsAg. Интегрированная форма вируса становится недоступной для иммунного контроля.

Инкубационный период варьируется от 1-4 до 6 месяцев, в среднем составляя 80 дней. Гепатит В протекает циклически с различными уровнями тяжести: легкой, средней и тяжелой.

Преджелтушный период длится 8-12 дней и более. Болезнь начинается постепенно. Характерны астеновегетативный (слабость, утомляемость, разбитость) и диспепсический (снижение аппетита, тошнота, иногда рвота, горечь во рту, тяжесть и тупые боли в правом подреберье) синдромы. Часты головная боль, нарушение сна.

У 20-30% пациентов отмечаются боли в крупных суставах, уртикарная сыпь, а в некоторых случаях — кожный зуд. В завершающей фазе преджелтушного этапа наблюдается увеличение печени (иногда также селезенки), а также темная моча и ахоличный кал. При проведении лабораторных исследований в моче выявляют уробилиноген, а иногда и желчные пигменты. В крови фиксируется повышенная активность АЛТ и АСТ, также обнаруживаются ДНК вируса и специфические маркеры HBV-инфекции (HBsAg, HBeAg, анти-HBcIgM). Преджелтушный период может отсутствовать, и тогда первыми признаками заболевания становятся потемнение мочи и желтушность склер.

Период желтухи. При возникновении желтухи состояние пациентов ухудшается: усиливается слабость, наблюдается снижение аппетита вплоть до анорексии, появляются тошнота, сухость во рту и горечь, часто возникают головные боли и головокружения, а суставные боли прекращаются. В этот период также значительно увеличивается размер печени. Постепенно желтуха усиливается, достигая своего пика на 2-3 неделе.

Моча становится тёмной, кал на высоте желтухи становится ахоличным. Продолжительность желтушного периода варьирует от нескольких дней до нескольких недель, чаще составляет 2-6 недель. Повышение активности АЛТ в 30-50 раз регистрируют в течение всего желтушного периода. Белково-синтетическая функция печени при ВГВ нарушается при тяжёлом течении болезни

(снижение концентрации альбумина, протромбинового индекса). В периферической крови наблюдается тенденция к лейкопении и лимфоцитозу, скорость оседания эритроцитов (СОЭ) может снижаться или оставаться в пределах нормы.

Существуют субклинические и инаппарантные формы (при отсутствии симптомов и клинических проявлений, но с обнаружением специфических маркеров гепатита В при уровне АЛТ, как повышенном, так и нормальном).

Подтверждение диагноза гепатита В осуществляется на основе выявления специфических серологических маркеров и ДНК вируса. Рекомендуется проведение тестирования на ДНК вируса гепатита В с использованием метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) как в качественном, так и в количественном измерении для пациентов с подозрением на острый вирусный гепатит В с целью ранней диагностики и определения уровня вирусной нагрузки.

ПЦР позволяет выявить ДНК вируса в сыворотке крови, лимфоцитах, что указывает на репликацию. ДНК ВГВ начинает обнаруживаться в крови в среднем через месяц после инфицирования и является первым диагностическим маркером ВГВ, опережая появление HBsAg на 10-20 дней. Исследование на ДНК ВГВ позволяет проводить раннюю диагностику ОГВ, выявлять скрытые (латентные) формы ГВ и мутантные по HBeAg штаммы вируса. Количественное определение ДНК ВГВ позволяет судить о вирусологическом ответе при лечении.

Положительный ПЦР-тест, полученный более 6 месяцев назад, свидетельствует о наличии хронической инфекции. Оценка вирусной нагрузки (количества вирусной ДНК в крови) помогает определить вероятность перехода заболевания в хроническую стадию. Увеличенные уровни печеночных трансаминаз при положительном ПЦР-результате указывают на необходимость начала лечения. Во время терапии вирусного гепатита В отсутствие ДНК вируса подтверждает успешность проведенного лечения.

Показания для назначения:

• диагностика острого вирусного гепатита В;
• выявление скрытых, бессимптомных форм гепатита В;
• диагностика гепатитов с разной этиологией — установление доминирующего вируса;
• оценка стадии активного размножения вируса при хроническом течении гепатита В;
• мониторинг эффективности терапии.

Референсные значения: не обнаружено (отрицательный результат).

Потребуется воздержаться от еды на протяжении 2-3 часов.

Отрицательный результат: ДНК вируса гепатита В не обнаружена или уровень находится ниже чувствительного порога метода.